檢測(cè)原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被免疫缺陷病毒抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中抗免疫缺陷病毒抗體（HIV Ab）的存在與否。

上海軒澤康生物96T試劑盒人免疫缺陷病毒抗體(HIV-Ab)ELISA試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）；

②陰性對(duì)照 0.5mL；

③陽(yáng)性對(duì)照 0.5mL；

④檢測(cè)抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL；

⑥稀釋液 6mL；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL；

⑨終止液 6mL；

⑩封板膜 2 張；說(shuō)明書 1 份；自封袋 1 個(gè).

備注：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材：

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

人免疫缺陷病毒抗體(HIV-Ab)ELISA試劑盒常見問(wèn)題解答：

1.   問(wèn)：如何選擇合適的陽(yáng)性對(duì)照？

上海軒澤物解答：陽(yáng)性對(duì)照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測(cè)樣本的組成一致，一般陽(yáng)性對(duì)照多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如：以人血清為標(biāo)本的測(cè)定，陽(yáng)性對(duì)照多用確定的病人血清或者以覆蓋人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 問(wèn)：我能否在實(shí)驗(yàn)開始前*收集樣品？

上海軒澤物解答：可以。如若收集的樣本不能及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，請(qǐng)保存至-20℃或按照說(shuō)明書進(jìn)行保存。應(yīng)避免反復(fù)凍融。

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