【摘要】：轉化生長因子β2（TGF-β2）是一種細胞外糖基化蛋白，屬于轉化生長因子β（TGF-β）超家族成員。它通過I型和II型受體（TGFβR1和TGFβR2）介導信號傳導，在細胞遷移、增殖、分化、胚胎發(fā)育、免疫調節(jié)及組織修復等生理過程中發(fā)揮關鍵作用。TGF-β2的信號傳導主要通過下游SMAD蛋白的磷酸化實現，調控目標基因表達。其生物學功能廣泛，包括抑制免疫細胞過度活化、促進細胞外基質合成、參與胚胎發(fā)育中的器官形成和組織模式化，以及在傷口愈合中調節(jié)炎癥反應和新生血管形成。

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牛轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒組成

操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

技術小提示：

1）加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，避免產生氣泡。加樣時間宜控制再10分鐘內。

2）可用洗板機洗板，每一步洗滌充分都是實驗的根本。

3）根據實際顯色情況酌情縮短或延長孵育時間，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度的時候即可終止。

4）終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。

5）實驗完畢后將未使用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至保質期。

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